El Anolyte Neutro, producido en las unidades equipadas con las células diafragmáticas de Envirolyte son producidas según los métodos siguientes:
• Un Método para Esterilizar agua y dispositivo para realizarlo (Patent Western Pacific Company Inc., Tallinn; No. 2100286; RU96123069; WO98/25855, EP0885849A1).
• Un Método para el tratamiento electroquímico de soluciones ácuosas y dispositivo para realizarlo (Patent Western Pacific Company Inc., Tallinn; No. 2100287; RU96123170; WO98/27012; EP0885848A1).
Las unidades Envirolyte EL-900 producen el Anolyte Neutro. Las propiedades bactericidas del Anolyte Neutral se probaron frente a la Legionella pneumophila. Agua potable Las propiedades microbiological del agua potable en Alemania , están determinadas por las Normas de agua potable alemanas (TVO: Trinkwasserverordnung, según edición:12.12.1990).
La Norma de Agua Potable explica en el capítulo 1., § 1. (propiedades de agua potable) es la siguiente:
(1) Las aguas potables deben ser libre de agentes patogenos. Este requisito no se cumple si en 100ml de agua potable el Escherichia coli es detectado (Límite). Los gérmenes de E. coli no se permiten que esten presentes en 100ml (límite).
Agua de piscinas
Las propiedades microbiologicas del agua de piscina en Alemania es determinada por la Norma de Industria alemana (DIN: 19643-1: “Aufbereitung von Schwimm –und Badebeckenwasser”).
La norma explicada en la Tabla 2 tiene los requisitos siguientes:
(1) La piscinas y el agua potable deben estar libre de agentes patogenos. Este requisito no se cumple si en 100ml en la piscina de Natación y en el agua potable el Escherichia coli y el Pseudomonas aeruginosa son detectados (Límite). Los gérmenes de E. Coli y Ps. Aerigunosa no se permiten en 100ml (límite).
(2) es más, las piscinas y el agua potable deben estar libre de la Legionella pneumophila. Los gérmenes de L. Pneumophila no se permiten en 100ml agua potable (límite). Los gérmenes de L. Pneumophila no se permiten en 1ml de agua en las piscinas de natación (límite).
Para realizar las pruebas se utilizo un equipo Envirolyte EL 900. Varias soluciones de Anolyte Neutral fueron producidas por esta unidad con una cantidad de cloro libre entre 300 y 500 mg/l.
Con el propósito de simular una aplicación práctica, el agente patógeno siguiente,Legionella Pneumophila, se usó y se aisló en una muestra de agua y en un caldo de cultivo. Por medio de dilución del agente patogeno con soluciones salina estériles se generaron las concentraciones necesarias. Para todo la prueba se usó agua del grifo (agua potable) de la ciudad de Lollar.
Producción de Anolyte Neutro
Una unidad Envirolyte fue utilizada para producir muestras de Anolyte Neutro. Durante la producción, la corriente era de ~30A, mantenida permanenetemente, tomandose muestras para su análisis, con los siguientes resultados:
Cloro libre: 300-500mg/l
PH - Valor: 8.2
Conductividad: 11.700 S/cm
ORP: 790mV
Preparación de muestras de Legionella
Se preparo un cultivo de agar -Legionella. Las muestras consistieron en 2 colonias cada 5ml Legionella-agar. Todas las diluciones se hicieron con agua de grifo de la ciudad de Lollar. Las pruebas se hicierón con 100ml de agua de grifo de la ciudad de Lollar al que la bacteria de la Legionella Pneumophila fue agregada para conseguir una concentración de L. pneumophila de 300 CFU/ml. (100ml de agua de grifo de la ciudad de Lollar y 0.1ml del Legionella-agar.)
Preparación de muestras de Anolyte Neutro
Para determinar a qué concentración de cloro libre la L. Pneumophila eran completamente inactivadas, se prepararon varias muestras de Anolyte Neutro. El Anolyte neutro con una concentración de cloro libre de 300-500mg/l se diluyó con agua de grifo de la ciudad de Lollar para conseguir las concentraciones siguientes de cloro libre:
• 20mg/L
• 40 mg/L
• 60mg/L
• 80mg/L
Se realizaron controles despues de:
• 1 minuto
• 5 minutos
• 10 minutos
• 30 minutos
• 60 minutos
Se utilizo tiosulfato sódico, un reactivo que destruye el cloro libre, se agregó a 10ml de las muestras para evitar que el cloro libre después de la toma siguiera actuando.
Finalmente se vertieron 0.05ml de la muestra con Legionella que contamino el agar, y se cultivo a 36ºC durante una semana.
Tabla 1: Muestra de la Prueba con 0.1 de Legionella-agar en 100ml de agua de grifo con varias concentraciones de cloro libre.
Concentración inicial de Legionella en la muestra: 300CFU/ml (= 30.000 CFU/100ml)
0.7 ml Anolyte Neutro: 20 mg/L cloro libre
Tabla 2: Muestra de la Prueba con 0.1 de Legionella-agar en 100ml de agua de grifo a varias concentraciones de cloro libre.
Concentración inicial de Legionella en la muestra: 300CFU/ml (= 30.000 CFU/100ml)
1.3 ml Anolyte Neutro: 40 mg/L cloro libre
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Tabla 3: Muestra de la Prueba con 0.1 de Legionella-agar en 100ml de agua de grifo a varias concentraciones de cloro libre.
Concentración inicial de Legionella en la muestra: 300CFU/ml (= 30.000 CFU/100ml) 2.0 ml Anolyte Neutro: 60 mg/L cloro libre
Tabla 4: Muestra de la Prueba con 0.1 de Legionella-agar en 100ml de agua de grifo a varias concentraciones de cloro libre.
Concentración inicial de Legionella en la muestra: 300CFU/ml (= 30.000 CFU/100ml) 2.6 ml Anolyte Neutro: 80 mg/L cloro libre
En esta prueba el Anolyte Neutro producido por las unidades Envirolyte se ensayaron para comprobar su efecto badtericida contra la Legionella Pneumophila. Se preparo el Anolyte Neutro con diferentes concentraciones de cloro libre y se agregaron a un caldo de Legionella-agar con una contaminación de 300 CFU/ml. Durante una hora de tiempo de contacto se tomaron las muestras y se observó el efecto del Anolyte Neutro.
La concentración de Legionella Pneumophila es relativamente baja (3x102 = 30.000 CFU/100ml). Sin embargo el efecto bactericida se pudo observar solamente cuando las muestras de Anolyte Neutro tenian unos 40mg/l cloro libre y después de 30 minutos .
Cuando la concentración de cloro libre en las muestras de Anolyte Neutro son de 80mg/l, entonces la Legionella Pneumophila son inactivadas en un minuto. No se observarón ningúna bactria durante el resto del periodo de la prueba.
